Анализ ПЦР — самый точный анализ на инфекции

Сегодня ведущие научные журналы регулярно публикуют обзоры, посвященные биологическим микрочипам, которые производят многие десятки компаний, а объем продаж составляет сотни миллионов долларов в год. Вместе с тем сама идея создания биочипов родилась лишь четверть века назад, и одним из мест рождения этой технологии стал Институт молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта Российской академии наук.

Диагностика туберкулеза

Анализ крови на туберкулез, выполнить который жители Санкт-Петербурга могут в нашей лаборатории, представляет собой эффективный способ диагностики этого опаснейшего заболевания на ранней стадии его развития в организме пациента. Таким образом, своевременно выполненный анализ на туберкулез позволяет пациенту выявить скрытые формы протекания этого заболевания, поражающего легкие и другие системы человека, и своевременным лечением предотвратить его перетекание в активную форму со всеми вытекающими отсюда последствиями. Так как потенциальными носителями туберкулеза является практически треть всего населения Земли, периодически сдать анализы на туберкулез в профилактических целях не повредит никому, а в особенности людям, входящим в ту или иную группу риска (медики, сотрудники исправительных учреждений, бывшие заключенные, родственники больных открытой формой туберкулеза). Кроме того, лабораторная диагностика туберкулеза будет актуальна для людей, имеющих характерные симптомы – продолжительный сухой кашель или кашель с выделением мокроты, частицами крови в ней, повышенную температуру на протяжении длительного времени, слабость или резкое уменьшение веса тела. Анализы для определения туберкулеза: методология исследований Современная диагностика туберкулеза использует различные методы определения этого заболевания в организме человека. ИФА — анализ на туберкулез, ПЦР, диагностика туберкулеза у детей пробой Манту – все эти методики выполняют одну задачу. В нашей лаборатории выявление и диагностика туберкулеза у пациентов выполняется методом иммуноферментного анализа (ИФА). Данный анализ на микобактерии туберкулеза достаточно доступен по своей стоимости и удобен для лаборантов, так как позволяет подвергать анализу одновременно значительное число проб, взятое у различных пациентов. Кроме того, анализ на антитела к туберкулезу методом ИФА является довольно оперативным и позволяет получить результаты уже через несколько часов после забора биоматериала. Также пациентам стоит понимать, что положительные или отрицательные результаты, которые показала диагностика туберкулеза по анализу крови, еще не являются основанием для точного диагноза этого заболевания. Их следует оценивать совместно с другой информацией о состоянии здоровья пациента (симптомами, результатами других исследований и так далее). Анализы для выявления туберкулеза: подготовка Прежде чем сдать анализ крови на туберкулез, необходимо выполнить единственное условие – воздерживаться от еды на протяжении 4 часов до забора биоматериала. Обратившись к «НМЛ», Вы можете сдать анализы на туберкулез легких без необходимости приезжать непосредственно в лабораторию. За дополнительную плату наш специалист может выехать на дом к пациенту для забора крови на исследование, результаты которого могут быть также доставлены на дом различными способами.

Исследование соскобов на туберкулез Mycobacterium tuberculosis complex

Методика определения генома возбудителя из биологической среды называется ПЦР-реакцией. Данный метод применим при многих инфекционных заболеваниях, в том числе и туберкулёзе. Для определения ДНК инфекционного агента исследуют соскобы, мочу, мокроту, плевральную жидкость, биоптаты, бронхиальный лаваж, секрет предстательной железы, ликвор, жидкость из синовиальных пазух, сперму, выделения и мазки из влагалища.

Сроки выполнения 1 день
Синонимы (rus) Анализ соскобов на туберкулез
Cинонимы (eng) Rea-time PCR,qPcr,qRT-PCRl , Mycobacterium tuberculosis complex
Методы ПЦР
Единицы измерения Копия/млн.
Подготовка к исследованию Отмена химиопрепаратов
Тип биоматериала и способы его взятия Соскоб со слизистых оболочек, кожи
Читайте также:  Прививка пентаксим: от чего проводится, техника проведения

Туберкулез — является одним из самых серьезных инфекционных заболеваний. Среди людей существует ошибочное мнение, что он поражает только легочную систему, что далеко от действительности. В процессы могут быть вовлечены любые органы и системы, поэтому спектр биоматериала для исследования ПЦР достаточно широк. Соскоб на туберкулез может быть произведен со слизистых ротоглотки, матки, уретры, слизистой влагалища, кожных покровов (при туберкулезе кожи, мягких тканей)Расходные материалы

  • Стерильный шпатель
  • Пробирка типа Эппендорф
  • Набор реактивов и тест-систем

ПЦР соскобов на комплекс Микобактерий, что это такое?Выявление ДНК или её фрагментов возбудителя туберкулёза в материале соскобов называется полимеразной цепной реакцией в реальном времени. Комплексной она называется потому, что определяются штаммы следующих видов:, , , , , , является 100% чувствительным методом, способным выявить палочку Коха при её любом количественном и качественном содержании в биоматериале. Показания для исследования на туберкулезЦель проведения ПЦР:

  • постановка диагноза лёгочных и внелёгочных форм туберкулёза,
  • контроль над эффективностью проводимой химиотерапией.

Когда назначают данный вид диагностики?

  • При трудностях в верификации диагноза
  • У ВИЧ- инфицированных больных
  • При необходимости постановки диагноза в кратчайшие сроки
  • При обследовании пациентов находящихся в длительном контакте с больным туберкулёзом
  • При атипичной реакции у детей на пробу Манту
  • При внелёгочных формах туберкулёза
  • При невозможности проведения других методов диагностики

Подготовка к обследованию

  1. За несколько дней до сдачи анализов необходимо прекратить прием химиопрепаратов и противовирусных средств
  2. Не стоит чистить зубы и полоскать горло, если соскоб берется из ротоглотки
  3. В том случае, когда соскоб необходим из уретры, мочиться можно за 2 часа до обследования, не ранее.
  4. Желательно накануне воздержаться от незащищенных половых контактов, если соскоб производится из влагалища, уретры, шейки матки.

Кто назначает данный анализ?

  • Фтизиатр
  • Терапевт
  • Уролог
  • Гинеколог
  • Лор-врач
  • Педиатр
  • Дермато-венеролог

Результаты и интерпретацияУ здоровых людей, в норме, палочка Коха не выявляется. Данный ответ считается наличии ДНК в соскобе анализ интерпретируется как положительный. Т.е имеется активная форма туберкулёза, требующая лечения. Что может повлиять на итоги анализы на туберкулез?В очень редких случаях может произойти контаминация биоматериала, что может дать ложный положительный приема противотуберкулезных препаратов и неправильный забор материала, могут дать отрицательный помнить, что заключение по результатам тестирования ставит только врач-специалист.

Общее описание

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) —это высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который способен идентифицировать возбудителей инфекционных болезней человека на основе выявления их генетического материала (ДНК или РНК) в пробах, полученных от обследуемого. Материалом для ПЦР-исследования служат биологические среды и жидкости человека: слизь, моча, кровь, мокрота, соскоб эпителиальных клеток, ткани плаценты, крови, сок простаты, околоплодные воды, плевральная и спинномозговая жидкость. ПЦР позволяет выявить активную стадию заболеваний в то время, когда бактериологические, вирусологические, иммунологические методы диагностики неэффективны.

Специалисты, широко практикующие ПЦР-диагностику:

  • гинеколог;
  • уролог;
  • инфекционист;
  • пульмонолог;
  • фтизиатр;
  • гастроэнтеролог;
  • гематолог;
  • онколог.

Возможны следующие результаты ПЦР-анализа:

  • отрицательный результат — означает, что в исследуемом биологическом материале не обнаружено никаких следов инфекции, которую пытались обнаружить;
  • положительный результат — с большой степенью точности указывает на наличие той или иной инфекции.

Инфекции, определяемые с помощью ПЦР-диагностики:

  • ВИЧ-инфекция;
  • вирусные гепатиты А, В, С, G;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • цитомегаловирусная инфекция;
  • папилломавирусная инфекция (в том числе ее онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59);
  • герпетическая инфекция;
  • инфекции, передающиеся половым путем (уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз);
  • туберкулез;
  • боррелиоз;
  • клещевой энцефалит;
  • листериоз;
  • кандидоз, в т.ч. кандидоз половых органов;
  • хеликобактерная инфекция.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах. ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Расшифровка результата

Для анализа ПЦР в Казани берутся разные биологические материалы. Для выявления инфекций половых органов необходимы выделения из половых органов, мазок из шейки матки и мочеиспускательного канала. Для определения гепатита С и ВИЧ сдается кровь.

Читайте также:  Как снять алкогольную интоксикацию в домашних условиях?

Результат ПЦР анализа может быть, как положительным, так и отрицательным. Отрицательный результат свидетельствует о том, что следы инфекции не обнаружены. Положительный результат с большой точностью указывает на инфекцию.

Получите точный результат, сдав анализ ПЦР в клинике МЕДЕЛ.

Туберкулез и лекарственная устойчивость

Первой в мире тест-системой на основе биочипов, зарегистрированной для медицинского применения, стал разработанный в ИМБ в 2004 г. набор «ТБ-Биочип‑1». С его помощью можно определить наличие в геноме микобактерии туберкулеза 47 мутаций, приводящих к устойчивости к двум основным противотуберкулезным препаратам – ​рифампицину и изониазиду.

Тест-системами серии «ТБ-Биочип» и оборудованием для их анализа были оснащены 20 учреждений противотуберкулезной службы РФ и 8 бактериологических лабораторий Федеральной службы исполнения наказаний. Число излеченных больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом увеличилось по меньшей мере в 3 раза при ранней постановке диагноза с использованием биочипов в отличие от диагностики традиционными методами (Gryadunov et al., 2011). В этом случае огромную роль играет такой фактор, как время анализа: в первом случае для диагностики достаточно нескольких часов, тогда как выращивание микобактерий на средах с разными противотуберкулезными препаратами занимает 2—3 месяца

Почему внимание исследователей привлек именно туберкулез? Дело в том, что многие десятилетия для борьбы с этой болезнью использовали комбинированное лечение сразу несколькими химиопрепаратами, чтобы повысить его эффективность. При монотерапии больные быстро приобретали устойчивость к лекарству. Однако такая стратегия привела к тому, что уже в конце прошлого века в мире, в том числе и в России, начал повсеместно распространяться туберкулез со множественной лекарственной устойчивостью. Именно этот фактор в наши дни чаще всего является причиной неудачного исхода лечения и возникновения рецидива болезни, от которой ежегодно в мире умирает более 3 млн человек.

Изониазид и рифампицин относятся к популярным и наиболее эффективным препаратам первого (основного) ряда. И если выделенный от пациента возбудитель окажется устойчивым к этим лекарствам, нужно обращаться к химиопрепаратам второго (резервного) ряда, к которым будет чувствительна эта бактериальная популяция. Сегодня одними из наиболее перспективных препаратов для лечения таких форм туберкулеза являются фторхинолоны. Поэтому следующей тест-системой в ряду диагностических тестов ИМБ стал «ТБ-Биочип‑2», с помощью которого можно выявить лекарственную устойчивость к различным классам этих препаратов (Грядунов и др., 2009).

Все более широкое распространение форм туберкулеза со множественной лекарственной устойчивостью явилось стимулом для дальнейшей «эволюции» тест-системы. Требовалось, во‑первых, максимально охватить весь спектр генетически детерминированной резистентности к широкому ряду противотуберкулезных препаратов. Во-вторых, возникла необходимость определять генотип и соответственно принадлежность выделенного штамма к основным семействам, циркулирующим на территории РФ, что важно не только для эпидемиологического мониторинга структуры популяции возбудителей туберкулеза, но и для назначения адекватной терапии.

Так в 2012—2013 гг. в результате масштабных геномных исследований был создан не имеющий мировых аналогов набор реагентов «ТБ-ТЕСТ», позволяющий одновременно идентифицировать 120 генетических локусов, отвечающих за развитие устойчивости к препаратам первой и второй «линии обороны»: рифампицину, изониазиду, этамбутолу, фторхинолонам и инъекционным препаратам (амикацину и капреомицину) (Zimenkov et al., 2016). Такая диагностика позволяет дифференцированно назначать высокие дозы химиопрепаратов или, напротив, удалять те или иные лекарства из схем терапии.

Читайте также:  Мильгамма: инструкция по применению (ампулы)

Чтобы получить государственную регистрацию в Росздравнадзоре, тест-система прошла все виды испытаний и экспертиз и с 2014 г. разрешена к применению в медицинской практике РФ. В настоящее время «ТБ-ТЕСТ» приходит на смену наборам «ТБ-Биочип».

К сведению:

Микобактерия – это живой организм с набором разнообразных и совершенных адаптационных механизмов, чутко реагирующих на изменения окружающей среды. Повреждающему внешнему воздействию противостоят средства защиты, приводящие к возникновению биологически трансформированного варианта возбудителя, выявление которого требует новых методов.

Диагностическую чувствительность этого метода можно повысить, если исследовать несколько образцов мокроты от одного пациента. Отрицательный результат бактериоскопического исследования не исключает диагноза туберкулёза, поскольку мокрота некоторых пациентов содержит меньше микобактерий, чем можно выявить с помощью микроскопии. Плохая подготовка мазков мокроты также может быть причиной отрицательного результата бактериоскопического исследования.

Запишитесь прямо сейчас! Имя Телефон Дата Email Даю согласие на обработку своих персональных данных Записаться

Телефон: 8 (495) 648-62-44

Показания к проведению исследования

ПЦР-диагностика коронавируса с предельно высокой на сегодняшний день точностью позволяет получить ответ на конкретный вопрос – болеет ли человек коронавирусом в данным момент. Это исследование не позволяет узнать, переболели вы ранее или нет.

Таким образом, учитывая текущие карантинные меры во многих странах, данный метод диагностики особенно актуален для людей, которые собираются поехать за границу или возвращаются домой.

В таких реалиях показаниями к проведению ПЦР теста являются:

  • наличие симптомов простудных заболеваний (в целях подтверждения или опровержения заболеваемости коронавирусом);
  • в случае контакта с больным в течение последних 14 дней;
  • возвращение домой после пребывания в стране с высоким риском заражения (чтобы избежать обсервации и карантинных мер);
  • если вы собираетесь выехать заграницу (результат предъявляется при пересечении границу и по приезду, чтобы избежать обсервации и подтвердить свою безопасность для окружающих);
  • в целях подтверждения того, что пациент, заболевший коронавирусом, выздоровел.

Молекулярно-генетические методы

Появились методы идентификации МБТ с помощью моноклональных антител, полученных способом гибридомной технологии. Сейчас существует более 100 моноклональных антител к эпитопам основных антигенов МБТ. Применение этих антител в иммуноферментном анализе дает возможность очень быстро дифференцировать вид возбудителя, но пока метол используется в научных разработках для идентификации возбудителя туберкулеза, который чаще всего встречается.

Среди молекулярно-генетических методов диагностики туберкулеза чаще всего применяется метод ДНК-зондов и полимеразной цепной реакции (ПЦР). В основе этих методов лежит принцип комплементарности нуклеотидных оснований в построении двуспиральной молекулы ДНК. При проведении ДНК-зондирования в случае наличия в пробе исследуемого специфического участка ДНК микобактерий образуется гибрид (двухцепной фрагмент) ДНК исследуемого и ДНК-зонда.

В основе приципа ПЦР лежит многократное увеличение фрагмента ДНК. Для амплификации (многократного удвоения гена бактерий) требуется наличие двух праймеров (затравок) — небольшого одноцепочечного фрагмента ДНК, что соединяется с комплементарной участком одной из цепей матричной ДНК. В дальнейшем происходит достройка этой цепи ДНК-полимеразой. Увеличение количества (в 106 раз) фрагмента амплифицируемого оказывается электрофорезом в агаровом геле. Учет результатов реакций осуществляется под пластинами трансиллюминатора в ультрафиолетовом свете,

ДНК-зондирование позволяет проводить определение микобактерий в диагностическом материале в течение 2-4 суток, а ПЦР — за 4-6 ч. с максимально высокой чувствительностью методов — 10-100-1000 клеток в пробе исследуемого.